Toxoplasma gondii induces prolonged host epidermal growth factor receptor signalling to prevent parasite elimination by autophagy: Perspectives for in vivo control of the parasite.

Toxoplasma gondii causes retinitis and encephalitis. Avoiding targeting by autophagosomes is key for its survival because T. gondii cannot withstand lysosomal degradation. During invasion of host cells, T. gondii triggers epidermal growth factor receptor (EGFR) signalling enabling the parasite to avoid initial autophagic targeting. However, autophagy is a constitutive process indicating that the parasite may also use a strategy operative beyond invasion to maintain blockade of autophagic targeting. Finding that such a strategy exists would be important because it could lead to inhibition of host cell signalling as a novel approach to kill the parasite in previously infected cells and treat toxoplasmosis. We report that T. gondii induced prolonged EGFR autophosphorylation. This effect was mediated by PKCα/PKCß âž” Src because T. gondii caused prolonged activation of these molecules and their knockdown or incubation with inhibitors of PKCα/PKCß or Src after host cell invasion impaired sustained EGFR autophosphorylation. Addition of EGFR tyrosine kinase inhibitor (TKI) to previously infected cells led to parasite entrapment by LC3 and LAMP-1 and pathogen killing dependent on the autophagy proteins ULK1 and Beclin 1 as well as lysosomal enzymes. Administration of gefitinib (EGFR TKI) to mice with ocular and cerebral toxoplasmosis resulted in disease control that was dependent on Beclin 1. Thus, T. gondii promotes its survival through sustained EGFR signalling driven by PKCα/ß âž” Src, and inhibition of EGFR controls pre-established toxoplasmosis.

Perfil químico y actividad antibacterial de los extractos de Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln / Chemical profile and antibacterial activity of extracts from Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln

Introducción: los líquenes, al presentar metabolitos secundarios como xantonas, antraquinonas y alcaloides, se han postulado como material con alto potencial biológico (e. g. antibiótico y antiviral), siendo el antibacterial muy promisorio, el cual se determina por medio de antibiogramas por difusión, punto central de esta investigación. Objetivo: evaluar la actividad antibacterial de los extractos de Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln. Olmo de hoja cortada. Métodos: el material liquénico se sometió a percolación con etanol 96 por ciento. Al extracto crudo etanólico se le realizó el aislamiento de alcaloides totales y flavonoides totales con adición de HCL 3 por ciento y metanol, respectivamente. Ambas fracciones, fueron monitoreados por cromatografía de capa fina y fraccionados utilizando cromatografía de columna. Los extractos y fracciones se sometieron a bioensayos sobre Escherichia coli y Staphylococcus aureus para la valoración de los halos de inhibición, utilizando como control Sultamicilina. Los ensayos fueron realizados tres veces con 2 réplicas. Resultados: al realizar la separación cromatográfica de los alcaloides, se observó aumento de la inhibición en comparación con la mezcla alcaloidal. La fracción A1 presenta valores de inhibición cercanos al control y presentó los menores valores de inhibición con respecto a los demás tratamientos evaluados. El efecto de la fracción de los flavonoides totales tuvo menor impacto sobre E. coli y S. aureus, sin embargo, es importante destacar la acción antibacterial de los compuestos nitrogenados de tipo alcaloidal sobre microoganismos Gram positivos. Conclusiones: en el perfil químico realizado a partir de los extractos de la especie de estudio se visualizó la presencia de metabolitos secundarios de tipo alcaloide y flavonoide, evidenciando el efecto antimicrobiano de los alcaloides presentes en el extracto y la fracción, lo cual ratifica el potencial farmacológico de tipo antibacterial, atribuido al núcleo Protoberberínico(AU)

Introduction: Due to their content of secondary metabolites such as xanthones, anthraquinones and alkaloids, lichens have been suggested to be a material of high biological potential (e.g. antibiotic and antiviral). Their very promising antibacterial potential may be determined by diffusion antibiograms, the main concern of the present study. Objective: Evaluate the antibacterial activity of extracts obtained from Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln, cutleaf elm. Methods: The lichenic material was percolated with 96 percent ethanol. Total alkaloids and total flavonoids were isolated from the crude ethanolic extract by adding 3 percent HCL and methanol, respectively. Both fractions were monitored by thin-layer chromatography and fractioned by column chromatography. Extracts and fractions were subjected to bioassays against Escherichia coli and Staphylococcus aureus for inhibition haloes, using sultamicillin as control. The assays were conducted 3 times with 2 replications. Results: Upon chromatographic separation of the alkaloids, an increase was observed in inhibition when compared with the alkaloidal mixture. Fraction A1 displayed inhibition values close to the control. Fraction FT showed lower inhibition values than the other treatments evaluated. The fraction of total flavonoids had a lesser impact on E. coli and S. aureus, but alkaloidal nitrogenated compounds had significant antibacterial activity against Gram-positive microorganisms. Conclusions: The chemical profile of extracts from the study species revealed the presence of alkaloidal and flavonoidal secondary metabolites, as well as the antimicrobial effect of the alkaloids contained in the extract and the fraction. This confirms the antibacterial pharmacological potential attributed to the protoberberine core(AU)

Perfil químico y actividad antibacterial de los extractos de Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln / Chemical profile and antibacterial activity of extracts from Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln

Introducción: los líquenes, al presentar metabolitos secundarios como xantonas, antraquinonas y alcaloides, se han postulado como material con alto potencial biológico (e. g. antibiótico y antiviral), siendo el antibacterial muy promisorio, el cual se determina por medio de antibiogramas por difusión, punto central de esta investigación. Objetivo: evaluar la actividad antibacterial de los extractos de Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln. Olmo de hoja cortada. Métodos: el material liquénico se sometió a percolación con etanol 96 por ciento. Al extracto crudo etanólico se le realizó el aislamiento de alcaloides totales y flavonoides totales con adición de HCL 3 por ciento y metanol, respectivamente. Ambas fracciones, fueron monitoreados por cromatografía de capa fina y fraccionados utilizando cromatografía de columna. Los extractos y fracciones se sometieron a bioensayos sobre Escherichia coli y Staphylococcus aureus para la valoración de los halos de inhibición, utilizando como control Sultamicilina. Los ensayos fueron realizados tres veces con 2 réplicas. Resultados: al realizar la separación cromatográfica de los alcaloides, se observó aumento de la inhibición en comparación con la mezcla alcaloidal. La fracción A1 presenta valores de inhibición cercanos al control y presentó los menores valores de inhibición con respecto a los demás tratamientos evaluados. El efecto de la fracción de los flavonoides totales tuvo menor impacto sobre E. coli y S. aureus, sin embargo, es importante destacar la acción antibacterial de los compuestos nitrogenados de tipo alcaloidal sobre microoganismos Gram positivos. Conclusiones: en el perfil químico realizado a partir de los extractos de la especie de estudio se visualizó la presencia de metabolitos secundarios de tipo alcaloide y flavonoide...(AU)

Introduction: Due to their content of secondary metabolites such as xanthones, anthraquinones and alkaloids, lichens have been suggested to be a material of high biological potential (e.g. antibiotic and antiviral). Their very promising antibacterial potential may be determined by diffusion antibiograms, the main concern of the present study. Objective: Evaluate the antibacterial activity of extracts obtained from Peltigera laciniata (Merrill ex Riddle) Gyeln, cutleaf elm. Methods: The lichenic material was percolated with 96 percent ethanol. Total alkaloids and total flavonoids were isolated from the crude ethanolic extract by adding 3 percent HCL and methanol, respectively. Both fractions were monitored by thin-layer chromatography and fractioned by column chromatography. Extracts and fractions were subjected to bioassays against Escherichia coli and Staphylococcus aureus for inhibition haloes, using sultamicillin as control. The assays were conducted 3 times with 2 replications. Results: Upon chromatographic separation of the alkaloids, an increase was observed in inhibition when compared with the alkaloidal mixture. Fraction A1 displayed inhibition values close to the control. Fraction FT showed lower inhibition values than the other treatments evaluated. The fraction of total flavonoids had a lesser impact on E. coli and S. aureus, but alkaloidal nitrogenated compounds had significant antibacterial activity against Gram-positive microorganisms. Conclusions: The chemical profile of extracts from the study species revealed the presence of alkaloidal and flavonoidal secondary metabolites, as well as the antimicrobial effect of the alkaloids contained in the extract and the fraction. This confirms the antibacterial pharmacological potential attributed to the protoberberine core(AU)